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        深低溫保藏細(xì)胞的解凍

        2011/5/17 [1159]

        深低溫保藏細(xì)胞的建議解凍步驟:

        離心法
        1.從凍存管中取出細(xì)胞,用37℃水浴快速解凍。
        2.將1-2ml 凍存細(xì)胞接種到大約25ml*生長培養(yǎng)基中。要非常
        輕柔地進(jìn)行混合。
        3.用大約80 X g的速度離心2-3分鐘。
        4.吸除上清液。
        5.用*生長培養(yǎng)基輕輕重懸解離下來的細(xì)胞,并計算活細(xì)胞的
        個數(shù)。
        6.接種細(xì)胞。細(xì)胞接種量至少要達(dá)到3X105 活細(xì)胞/ml。


        直接接種法
        1.從凍存管中取出細(xì)胞,用37℃水浴快速解凍。
        2.將細(xì)胞直接接種到*生長培養(yǎng)基中。每毫升凍存細(xì)胞需要 
         10-20ml*生長培養(yǎng)基。計算活細(xì)胞的個數(shù)。細(xì)胞接種量至
         少要達(dá)到3X105 活細(xì)胞/ml。
        3.將細(xì)胞培養(yǎng)12-24h。更換新鮮*生長培養(yǎng)基以去除抗凍劑。