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        魚γ干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

        2015-09-08 [1532]

        魚γ干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
        檢測范圍:
        96T
        3ng/L - 90ng/L
        使用目的:
        本試劑盒用于測定魚血清、血漿及相關液體樣本中γ干擾素(IFN-γ)含量。
        實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中魚γ干擾素(IFN-γ)水平。用純化的魚γ干擾素
        (IFN-γ)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入γ干擾素(IFN-γ),
        再與 HRP標記的γ干擾素(IFN-γ)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗
        滌后加底物 TMB顯色。TMB在   HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終
        的。顏色的深淺和樣品中的γ干擾素(IFN-γ)呈正相關。用酶標儀在 450nm波長下測定
        吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中魚γ干擾素(IFN-γ)濃度。
        標本要求
        1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
        馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
        2.不能檢測含NaN3的樣品,因   NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
        操作步驟
        1.  標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
        釋。
        2.  加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、
        待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止

        液后 15分鐘以內(nèi)進行。
        魚γ干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書操作程序總結:
        計算以標準物的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與  OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù)即為樣品的實際濃度。

        注意事項
        1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
        2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
        3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
        4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本  OD值大于標準品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
        5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
        6.底物請避光保存。
        7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
        8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
        9.本試劑不同批號組分不得混用。
        10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
        魚γ干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書保存條件及有效期
        1.試劑盒保存:;2-8℃。
        2.有效期:6個月